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聚丙烯酰胺凝膠電泳作用與用途

發(fā)布時(shí)間:2022-08-30 11:11:51    作者:  來(lái)源:本站  人氣:577

  聚丙稀銑胺凝膠電泳簡(jiǎn)稱(PAGE),是一種新型首選技術(shù),很多人對(duì)它很陌生,接下來(lái)本文就給大家介紹一下聚丙烯酰胺凝膠電泳是如何工作的,主要用在哪里:

聚丙烯酰胺凝膠電泳

  

  PAGE是一種技術(shù),根據(jù)蛋白質(zhì)等大分子的電泳遷移率(即分析物向相反電荷的電極移動(dòng)的能力)來(lái)分離它們。在PAGE中,這由分子的電荷、大小(分子量)和形狀決定,分析物通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠中形成的孔隙移動(dòng)。

聚丙稀銑胺凝膠電泳原理

  

  PAGE的基本原理是通過(guò)電流使分析物通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠的孔隙來(lái)分離它們。為了實(shí)現(xiàn)這一目的,通過(guò)添加過(guò)硫酸銨(APS)使丙烯酰胺-雙丙烯酰胺混合物聚合(聚丙烯酰胺)。在四甲基乙二胺(TEMED)的催化下,該反應(yīng)形成了一個(gè)類似于網(wǎng)狀的結(jié)構(gòu),其中有孔隙,分析物可以通過(guò)它移動(dòng)。

聚丙稀銑胺凝膠電泳作用

  

  由于電泳過(guò)程中的電阻較小,較小的分子遷移得更快。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和電荷也影響遷移率。十二烷基硫酸鈉和聚丙烯酰胺消除了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和電荷的影響,蛋白質(zhì)根據(jù)多肽鏈的長(zhǎng)度進(jìn)行分離。較小的孔徑也會(huì)降低小蛋白質(zhì)在凝膠中移動(dòng)的速度,提高它們的分辨率,防止它們?cè)陔娏髯饔孟卵杆倥艿骄彌_液中。

  廣泛用于法醫(yī)學(xué)、遺傳學(xué)、生物技術(shù)和分子生物學(xué)的技術(shù)。


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